用來測量待測物質(zhì)對可見光的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計;紫外可見分光光度計用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器??梢詼y定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度。
紫外可見分光光度法的定量分析基礎(chǔ)是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度 的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。
紫外可見分光光度計具體用途有哪些?
1、濃度鑒定
首先配置一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在一定波長下,測試每個標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,繪制吸光度/濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。當(dāng)測定未知濃度溶液時,將測出的數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,即可獲知溶液的濃度。
2、純度鑒定
紫外可見分光光度計可用來檢驗化學(xué)物質(zhì)的純度。如果有機化合物在紫外可見區(qū)沒有明顯的吸收峰, 而它的雜質(zhì)在紫外區(qū)有較強的吸收峰, 就可以檢測出有機化合物的雜質(zhì)。
3、定性分析
將未知樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品放到同等環(huán)境下用紫外可見分光光度計測量,如果得到紫外吸收光譜的最大吸收峰和最小吸收峰波長、吸收峰數(shù)量、位置等數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)樣品的數(shù)據(jù)一致,就表明未知樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品為同一種物質(zhì)。當(dāng)沒有標(biāo)準(zhǔn)樣品時,可通過查閱標(biāo)準(zhǔn)圖譜來分析判斷。